货 号: P1240 名 称: 酵母蛋白小量提取试剂盒 规 格: 50T/100T 价 格: 320/560 CAS #: 酵母蛋白小量提取试剂盒 一,试剂盒组份 组份 (50T) (100T) 酵母裂解液 50mL 100mL 玻璃珠 3g 6g PMSF(100X) 1ml 1ml β-巯基乙醇 1ml 1ml 二,说明 酵母蛋白小量提取试剂盒用于从酵母细胞中分提取可溶性各种蛋白。提取的蛋白可用于各种常规实验。如PAGE,Western,*沉淀(immunol precipitation,IP)和*共沉淀(co-IP)。酵母裂解液中不含任何去污剂,可用各种方法测定蛋白含量。 三,操作步骤 酵母常规培养。 离心收集酵母。大概50-100ul的积压体积。完全弃上清。 加入酵母裂解液,吹打重重悬。再次离心,弃上清(此步的目的是将酵母洗一下,也可以省掉此步)。 在酵母菌中,再加入0.5ml裂解液,加入5ul PMSF,5ulβ-巯基乙醇(较好在通风处操作)。加入50mg左右的玻璃珠,预冷,涡流10min(每涡流1min,可以冰上冷却1min)。 离心,取上清。进行下一步实验或者-70℃储存。 三,注意事项 1,不同的酵母可能须涡流时间不同,可根据实际情况延长或者缩短时间。(比如蛋白浓度高低,蛋白降解情况等。) 2,如果一个月内能够用完,可将β-巯基乙醇按照百分之一的量一次性全部加入酵母裂解液中。2-8度保存。 3,因为是采用物理方法破解酵母壁,所以对于酶等一些易失活蛋白可能并不适合。 4,为了你的实验*,请戴手套操作。并注意通风。